کشت غیر مداوم با تراکم سلولی بالا برای تولید فاکتور رشد اپیدرمی انسانی نوترکیب در باکتری اشریشیاکلای و بررسی فرایند خالص سازی محصول
پایان نامه
- وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تربیت مدرس - دانشکده مهندسی شیمی
- نویسنده سید بابک موسوی
- استاد راهنما سید عباس شجاع اساداتی رسول خلیل زاده
- تعداد صفحات: ۱۵ صفحه ی اول
- سال انتشار 1391
چکیده
فاکتور رشد اپیدرمی انسانی (hegf) یک پلی پپتیدی 53 آمینو اسیدی با وزن مولکولی 2/6 کیلو دالتون است. این فاکتور رشد به دلیل قابلیت تحریک رشد سلول های پوستی کاربرد گسترده ای در درمان زخم های پوستی پیدا کرده و کاربرد آن به عنوان افزودنی در لوازم آرایشی روز به روز در حال افزایش است. در این پژوهش از کشت غیر مداوم با تراکم سلولی بالای باکتری اشریشیاکلای نوترکیب برای تولید فاکتور رشد اپیدرمی انسانی به صورت درون سلولی استفاده شد. در کشت غیر مداوم همراه با خوراک دهی، در مدت زمان 22 ساعت وزن خشک سلولی 31 گرم بر لیتر به دست آمد. فاکتور رشد اپیدرمی انسانی به شکل توده های پروتئینی نامحلول از باکتری نوترکیب اشریشیاکلای نوترکیب جدا شده سپس.توده های پروتئینی نامحلول در بافر تریس حاوی 2 مولار اوره با ph قلیایی و بافر تریس حاوی اوره 8 مولار، حل شده و خالص سازی آن با استفاده از اولترافیلتراسیون با غشاهای سلولز تری استات با برش حذفی 5، 10 و 20 کیلو دالتون بررسی شد. در نهایت برای خالص سازی بیشتر نمونه محلول پروتئینی به دست آمده از مرحله اولترا فیلتراسیون، از کروماتوگرافی صافی ژل استفاده شد.
منابع مشابه
ابداع روشی کم هزینه و دقیق برای خالص سازی فاکتور رشد اپیدرمی انسانی نوترکیب (hegf)
فاکتور رشد اپیدرمی(egf) انسانی با 53 اسید آمینه و وزن مولکولی 2/6 کیلو دالتون، پروتئینی با قابلیت تحریک رشد چندین نوع سلول است و به دلیل همین ویژگی در موارد پزشکی و تهیه فراورده های آرایشی کاربردهای بسیاری دارد. در این پژوهش، ابتدا پلاسمید pet23a(+) حاوی ژن egf به باکتری اشرشیاکلی سویه bl21(de3) منتقل شد که سویه نوترکیب به دست آمده قادر به تولید فاکتور رشد اپیدرمی انسانی به صورت درون ریز بود. ...
متن کاملجداسازی و خالص سازی فاکتور رشد اپیدرمی انسانی از باکتری اشرشیا کلی نوترکیب
فاکتور رشد اپیدرمی انسانی (hegf) ، یک پلی پپتید کوچک تک زنجیره ای با وزن مولکولی 6201 دالتون و دارای 53 آمینواسید می باشد. این پروتئین در شرایط درون تنی،یک میتوژن قوی برای اغلب سلول های کشت داده شده با منشاء اپیدرمی می باشد و در شرایط برون تنی، تکثیر و تمایز سلول هایی ازبافت های متنوع را تحریک می کند.دراینپژوهشابتداپلاسمیدنوترکیبpet23a(+)بهباکتریاشرشیاکلیسویهbl21(de3)منتقلوفاکتور رشد اپیدرمی ان...
15 صفحه اولابداع روشی کم‌هزینه و دقیق برای خالص‌سازی فاکتور رشد اپیدرمی انسانی نوترکیب (hEGF)
فاکتور رشد اپیدرمی(EGF) انسانی با 53 اسید آمینه و وزن مولکولی 2/6 کیلو دالتون، پروتئینی با قابلیت تحریک رشد چندین نوع سلول است و به دلیل همین ویژگی در موارد پزشکی و تهیه فراورده های آرایشی کاربردهای بسیاری دارد. در این پژوهش، ابتدا پلاسمید pET23a(+) حاوی ژن EGF به باکتری اشرشیاکلی سویه BL21(DE3) منتقل شد که سویه نوترکیب به دست آمده قادر به تولید فاکتور رشد اپیدرمی انسانی به صورت درون‌ریز ب...
متن کاملتولید آزمایشگاهی فاکتور رشد اپیدرم انسانی نوترکیب و ارزیابی عملکرد آن در بقای سلولی
Background and purpose: Human epidermal growth factor (hEGF) is a polypeptide of 53 amino acids with various medical application such as wound healing. The purpose of this study was cloning, expression, and purification of recombinant human EGF (rhEGF) and assessment of its mitogenic effect on NIH 3T3 cells. Materials and methods: Subcloninig of hEGF was performed in to pET24a (+). Protein e...
متن کاملافزایش تولید هورمون رشد انسانی نوترکیب در سلول‌های CHO از طریق کنترل شرایط کشت سلولی
هدف: هدف این مطالعه افزایش تولید هورمون رشد انسانی توسط اضافه کردن ترکیبات شیمیایی به محیط کشت فاقد سرم سلول‌های CHO و بررسی خواص hGH تولید شده می‌باشد. مواد و روش‌ها: در این مطالعه، تاثیر تیمارهای مختلف شامل غلظت‌های مختلف گلیسرول،DMSO ، NaBu و ZnSO4 در سلول‌های CHO مورد بررسی قرار گرفت و تولید GH بهروش الایزا سنجیده شد.سلول‌ها به هر چاهک یک پلیت 12 خانه حاوی DMEM-F12 و FBS10 درصد اضافه شدند...
متن کاملبیان نوترکیب فاکتور رشد اپیدرم انسانی در باکتری E. coli و ارزیابی اثر آن بر دودمان سلولی NIH-3T3
خانواده EGF شامل 13 عضو می باشد و فاکتور رشد اپیدرم انسانی یکی از اعضای این خانواده شناخته شده که در ترمیم زخم های اپیدرم پوستی ایفای نقش می کند. این فاکتور، یک پلی پپتید اساسی برای ترمیم زخم و آغاز تقسیم میتوزی است. در این مطالعه، ژن فاکتور رشد اپیدرم انسانی از بانک ژنی استخراج و پس از بهینه سازی کدون‌های آن براساس ترجیح کدونی باکتریE. coli در وکتور pET21a(+) سنتز گردید. وکتور حامل ژن مذکور به...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده{@ msg_add @}
نوع سند: پایان نامه
وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تربیت مدرس - دانشکده مهندسی شیمی
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023